T细胞受体(TCR)测序

T细胞受体(T cell receptor,TCR)是T细胞表面,负责特异性识别与MHC(主要组织相容性复合体)结合的抗原肽的蛋白。当TCR与抗原肽和MHC结合时,T淋巴细胞通过信号转导被激活,进入后续的免疫应答过程。 人类基因组中有4个TCR基因:

两个编码轻链TCR:TRA基因编码TCRα,TRG基因编码TCRγ;

两个编码重链TCR:TRB基因编码TCRβ,TRD基因编码TCRδ;

重链TCR和轻链TCR形成异源二聚体,组成完整的TCR。在人类中存在两种TCR:TCRα/β和TCRγ/δ,其中95%的T细胞表达TCRα/β,称为αβT细胞;5%的T细胞表TCRγ/δ,称为γ/δT细胞。该比例在个体发育过程中和患病状态(例如白血病)中发生变化,物种之间也有所不同。

成熟的重链TCR基因由可变区(V)、多变区(D)、连接区(J)和恒定区(C)四部分基因片段组成(VDJC),轻链TCR则缺少D区(VJC)。重链和轻链TCR都具有3个互补决定区(complementarities determining region, CDR),在抗原识别中起主要作用:

CDR1和CDR2相对保守,负责识别MHC;

CDR3是负责识别抗原的主要CDR;

TCR基因是人类基因组中复杂度最高的基因,也是变异程度最高的基因。人外周血中大概含有2x1016~1018种表达不同的TCR的T细胞。这个复杂度主要源自3个因素:

组成的多样性:成熟TCR的VDJC/VJC结构,是通过复杂的重组生成的。基因组中有65~100种V基因片段、2种D基因片段和13种J基因片段,TCR重组时需要从上述三种片段中各选一个,这赋予了TCR高度的多样性;

连接的机动性:在重排的过程中,在V-D及D-J的连接区经常有非模板的核苷酸的随机插入或删除,进一步增加了CDR3区的多样性;

体细胞突变:T细胞D区的突变频率约为正常的1000倍;

TCR-seq常用于评价各种免疫相关疾病和遗传性突变引起的某个物种所有T细胞或特定T细胞激活介导的细胞免疫反应中TCR基因重排碱基序列,以及各序列的丰度,用于研究不同T细胞克隆的转录情况和相互间关系,从而揭示更深层次的T细胞功能特异性,继而解释免疫应答机制、免疫耐受原因,免疫调节形式等相关生命现象。